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原因一：篩板堵塞

液相色譜柱入口篩板堵塞是最常見的問題之一，會導(dǎo)致柱壓升高、色譜峰拖尾、塔板數(shù)降低等問題。通常分析樣品中微粒雜質(zhì)最右可能堵塞色譜柱入口，因此分析時，需要先過濾或者離心，乳濁或渾濁樣品應(yīng)以0.25μm濾膜處理，也可用針頭過濾器過濾。進(jìn)樣器與泵密封墊的磨損也會帶入微粒，在進(jìn)樣閥與色譜柱之間使用0.25μm或0.45μm的在線過濾器，通?？梢员苊膺@類問題。

原因二：強(qiáng)保留樣品組分

強(qiáng)吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上，能嚴(yán)重地影響色譜柱壽命。像生物組織或體液的提取物、天然產(chǎn)物等復(fù)雜樣品，極易造成柱頭的污染。相對較純的樣品，一般不會出現(xiàn)這一問題。液相色譜柱應(yīng)用中，色譜峰嚴(yán)重拖尾或分裂往往是強(qiáng)保留污染物在柱頭吸附的體現(xiàn)。

原因三：色譜柱裝填不良

裝填不良的液相色譜柱，在短時間應(yīng)用后，填充床的壓縮通常使柱頭處產(chǎn)生塌陷，導(dǎo)致柱效突然降低。色譜柱的初始評價(jià)指標(biāo)，如塔板數(shù)、不對稱因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩(wěn)定性，這種情緒只能在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)。

原因四：壓力因素

液相色譜儀色譜柱使用過程中的驟然壓力波動、機(jī)械撞擊或溫度驟然變化都會對色譜柱床層產(chǎn)生影響，導(dǎo)致峰形變差和柱效降低。進(jìn)樣過程中，進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)動太慢可引起壓力波動，使色譜柱床產(chǎn)生裂隙，在柱切換時也存在同樣的問題。使用填充良好的色譜柱，在較低柱壓下操作，可大大減少由壓力波動造成的色譜柱損壞。