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近期，隨著經(jīng)濟(jì)的復(fù)蘇，維生素類飼料添加劑銷售量大大增加，尤其是維生素E飼料添加劑，所以飼料中維生素E的檢測就顯得尤為緊急和重要。

賽智科技應(yīng)用檢測部參考國標(biāo)（GB/T 17812-2008），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經(jīng)實(shí)踐檢測可提供飼料中維生素E的HPLC檢測方案，得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢出限好，適用于配合飼料、濃縮飼料、復(fù)合預(yù)混合飼料、維生素預(yù)混合飼料中維生素E（dl-α-生育酚）的測定，僅供廣大用戶參考。

以下是維生素E的測定的詳細(xì)檢測方法。

1、儀器與試劑

1.1 儀器

LC-10Tvp高效液相色譜儀

Vertex 色譜柱　：150mm×4.6mm×5μm

分析天平，感量為0.0001g

圓底燒瓶，帶回流冷凝器

恒溫水浴鍋

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器

超純水器

1.2  試劑

碘化鉀溶液。

淀粉指示液。

硫代硫酸鈉溶液。

水乙醚:不含過氧化物。

無水乙醇。

1,4-二氧六環(huán)。

甲醇，色譜純。

2,6-二叔丁基對甲酚（BHT）。

氫氧化鉀溶液。

酚酞指示劑。

氮?dú)猓兌?9%）。

L-壞血酸。

維生素E（dl-α-生育酚）對照品。

2、試樣溶液的制備

2.1  皂化

稱取適量試樣，置入圓底燒瓶中，加L-壞血酸乙醇溶液，使試樣完全分散、浸濕，置于水浴上加熱直到沸點(diǎn)，用氮?dú)獯迪瓷岳鋮s后，加氫氧化鉀溶液，混合均勻，在氮?dú)饬飨路序v皂化回流，不時(shí)震蕩防止試樣粘附在瓶壁上，皂化結(jié)束，分別用無水乙醇、水自冷凝管頂端沖洗其內(nèi)部，取出燒瓶冷卻至40℃。

2.2 提取

定量的轉(zhuǎn)移全部皂化液于盛有無水乙醚的分液漏斗中，用蒸餾水分2次~3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗，加蓋、放氣，隨后混合，激烈震蕩，靜置、分層。轉(zhuǎn)移水相于第二個分液漏斗中，分次用乙醚重復(fù)提取兩次，棄去水相，合并三次乙醚相。用蒸餾水多次洗滌乙醚提取液至中性，初次水洗時(shí)輕輕旋搖，防止乳化。乙醚提取液通過無水硫酸鈉脫水，轉(zhuǎn)移到棕色容量瓶中，加BHT使之溶解，用乙醚定容至刻度。

2.3 濃縮

從乙醚提取液中分取一定體積置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器燒瓶中，在部分真空、水浴溫度50℃的條件下蒸發(fā)至干或用氮?dú)獯蹈?。殘?jiān)眉状既芙獠⑾♂?，離心或通過0.45μm過濾膜過濾，用于高效液相色譜儀分析。

3、色譜條件

色譜柱：VertexC18（4.6 mm×250 mm×5 μm）

流動相：甲醇：水=98:2

流速為：1.0mL/min

進(jìn)樣量：20μL

檢測波長為：285 nm

柱溫：室溫

4、色譜圖